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熒光分光光度計(jì)如何來(lái)測(cè)定維生素B2的含量?
更新時(shí)間:2017-07-19 點(diǎn)擊次數(shù):2448
 一、儀器和試劑   
(1)儀器 熒光光度計(jì)、四面通石英比色皿一個(gè):1cm 、1和2 mL刻度移液管各一支、吸耳球、洗瓶、鏡頭紙。   
(2)試劑 10.0μg/ml維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液、二次蒸餾水 
二、實(shí)驗(yàn)步驟   
(1). 打開(kāi)氙燈,再打開(kāi)主機(jī),然后打開(kāi)計(jì)算機(jī)啟動(dòng)工作站并初始化儀器,預(yù)熱30min  
(2) 儀器初始化完畢后,在工作界面上選擇測(cè)量項(xiàng)目,設(shè)置適當(dāng)?shù)膬x器參數(shù):設(shè)置發(fā)射波長(zhǎng)為540 nm,在200~500范圍內(nèi)掃描,紀(jì)錄熒光發(fā)射強(qiáng)度和激發(fā)波長(zhǎng)的關(guān)系曲線,便得到激發(fā)光譜。從激發(fā)光譜圖上可以找出其zui大激發(fā)波長(zhǎng)為440nm   
(3)標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品的熒光測(cè)定      
將激發(fā)波長(zhǎng)固定在440nm,熒光發(fā)射波長(zhǎng)為540nm。測(cè)量上述系列標(biāo)準(zhǔn)維生素Bz溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度。以溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。      
在同樣條件下測(cè)定未知溶液的熒光強(qiáng)度,并由標(biāo)準(zhǔn)曲線確定未知試樣中維生素Bz的濃度,計(jì)算藥片中的維生素Bz的含量。  
(4)退出主程序,關(guān)閉計(jì)算機(jī),先關(guān)主機(jī),zui后關(guān)氙燈。

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